Servicio de Microscopía
SERVICIO DE MICROSCOPÍA IBGM
ÍNDICE
1.   EQUIPOS
a.   MANEJO.
b.   RESERVA.
d.   LIMPIEZA.
3.   FORMULARIOS
4.   TARIFAS.
1.    EQUIPOS

     Los equipos integrados en la Unidad de Microscopía son:

en verde se muestran los microscopios invertidos en los que se pueden hacer live cell imaging, en rojo los microscopios directos que solo pueden utilizarse con muestras fijadas.:
1. Microscopio Confocal Leica TCS SP5X, con escáneres galvanométrico (100-1000 Hz) y resonante (8000Hz) y 3 PMT de Fluorescencia +1PMT Campo claro. Equipado con Cabina para Experimentos de Célula Viva, preparado para experimentos de larga duración(time lapse), con condiciones de Temperatura y CO2
  • Laser Blanco (470 nm670 nm)
  • 5 líneas de laser de Argón: 458, 476,488, 496 y 515
  • Diodo azul de 405 nm
  • Objetivos: 10x, 20x, 40x (oil) y 63x (oil).
  • Localización: D6
2. Microscopio de Fluorescencia NIKON Eclipse Ni,equipado con cámara CMOS de resolución ultra alta (16.25mP) NIKON, modelo DS-Ri2. Está dotado de un sistema con distintas líneas LED lo cual tiene dos ventajas fundamentales:
- Mayor eficacia en la excitación evitando excitar fluorocromos no deseados al no utilizar un rango.
- Estabilidad máxima en la excitación, lo que garantiza máxima fiabilidad en estudios de cuantificación.
  • Objetivos: 4x, 10x, 20x, 40x, 60x (oil).
  • Filtros: DAPI, FITC, TRITC y Cy5
  • Localización: D6
3. Microscopio de Fluorescencia NIKON Eclipse 90i, equipado con cámara CMOS de alta definición (5.9 mP) NIKON, modelo DS-Fi3.
  • Objetivos: 4x, 10x, 20x, 40x, 60x (oil) y 100x (oil).
  • Filtros: UV-2A, B-2A, G-2A y Cy5
  • Localización: D6
4.Microscopio de fluorescencia NIKON Eclipse 80i.
  • Objetivos: 1x, 2x, 4x, 10x, 20x, 40x, 60x (oil).
  • Filtros: UV-2A y B-2A .
  • Localización: C9
  5. Microscopio de FRET para live cell imaging Leica DMi8, con cámara sCMOS K5 (4.2 mP). Ruedas de filtros externas superrapidas con intercambio de filtros en solo 25 ms. Está dotado de pletina motorizada en el eje Z y de software de deconvolución AutoQuant de acceso directo desde el software de adquisición, lo cual facilita enormemente el trabajo. Sistema de Iluminación Leica LED3. Adquisición a alta velocidad (40 fps) con sistema de mantenimiento de foco por infrarrojo, ideal para experimentación in vivo. Posibilidad de realizar experimentos de Ca2+ con sondas como Fluo-4 , o ratiométricos de FRET con pares CFP/YFP o GFP/mCherry
  • Objetivos: 10x y 60x (oil).
  • Filtros: CFP (Ex 430/24 Em 470/24) y YFP (Ex 500/20-490 Em 535/30). GFP (Ex 470/40 Em 525/54) y mCherry (Ex 572/35-490 Em 632/60) DAPI Ex405/60 DC455 Em470/40  Cy5 Ex 640/30 DC660 Em 690/50
  • Localización: D3
6. High Throughput Imaging System Cytation 5 de Biotek Cytation 5 combina la microscopía automatizada con la detección en microplacas convencionales en una única plataforma. El módulo de microscopía ofrece adquisición de imágenes en tres canales de fluorescencia, campo claro a color y contraste de fases digital. Está equipado con un control ambiental de temperatura y CO2 para poder realizar experimentos de live cell imaging.
  • Objetivos: 10x, 20x, 40x y 60x.
  • Filtros: DAPI, FITC y TRITC.
  • Localización: D2
2.   NORMAS DE FUNCIONAMIENTO
MANEJO
     El personal del servicio es la única persona autorizada para realizar manipulaciones que impliquen algún tipo de montaje en el equipo, tales como el cambio de las lámparas, objetivos o filtros. Los usuarios, sólo estarán autorizados a realizar las operaciones oportunas para la búsqueda de campos, captura de imágenes, y análisis de las mismas. Si no se tiene conocimiento sobre el funcionamiento de un equipo, se debe contactar con el técnico responsable (crissv@uva.es, rebeca.llorente@uva.es), y solicitar un entrenamiento básico previo a la utilización de los equipos.
RESERVA
    La reserva de los aparatos se realizará a través de la intranet del centro

    Dentro del área de Reservas, en el apartado destinado a Microscopía:

Se permite la reserva de un mínimo de 30 minutos y un máximo de dos horas para un mismo usuario y para las Unidades de Microscopía A y B. Para los microscopios confocal y de FRET, debido a que el uso puede ser mayor de dos horas, se permite ampliar la reserva, en función del tipo de experimento, muestreo que se quiera hacer. En el caso en el que no se fuera a hacer uso de la reserva, es importante realizar la anulación con una antelación mínima de una hora, para facilitar a otros usuarios la posibilidad de utilizar el equipo. La reserva del microscopio Confocal Leica SP5X, se realizará con una antelación mínima de un día, contactando con el técnico para informar de los fluorocromos empleados, y facilitar la búsqueda de un método adecuado y óptimo para cada muestra. Para ello, existe un enlace dentro de la página de la reserva en la que aparece “Documento para la solicitud”, que el usuario mandará al técnico una vez haya rellenado, vía e-mail o en persona. Así mismo, se recomienda la reserva con antelación para todos los microscopios, sobre todo en aquellos casos en los que se necesite la ayuda o asesoramiento del técnico, o se trate de un experimento que deba realizarse un día concreto. De ese modo se evita que pueda haber otro usuario reservado. El servicio ofrecido a los investigadores internos del IBGM es gratuito. Los investigadores no registrados y externos al IBGM, que estén interesados en el uso del recurso, deberán examinar detenidamente los procedimientos del servicio y ponerse en contacto con el personal de la unidad.
INCIDENCIAS
Cualquier duda, problema o fallo de funcionamiento de cualquiera de los equipos, debe ser comunicado con la mayor brevedad posible al responsable del servicio, ya bien sea, en persona o vía correo electrónico comunicando la incidencia, y debe anotarse claramente en el parte de trabajo, donde, también es de obligado cumplimiento la anotación de las horas de uso del equipo, así como el contador de la lámpara de fluorescencia en caso de disponer de ese sistema de iluminación. Los archivos guardados en los ordenadores de los microscopios se mantendrán de manera semestral. Pasado ese tiempo, se realizará un borrado general de los archivos que superen el periodo establecido. Se dará aviso previo a su eliminación. Para evitar posibles problemas de pérdidas de imágenes, se ruega que los usuarios guarden sus imágenes en las carpetas compartidas del servidor, y las cojan de ahí en un periodo corto. El usuario tiene la obligación, si nadie le avisa de lo contrario, de apagar la lámpara de fluorescencia una vez que haya concluido su hora de reserva. Recordad, que hay que esperar 30 minutos para volver a encenderla de nuevo. (muy importante esta consideración, de cara, tanto a una toma de mejores imágenes como a una prolongación de la vida de la lámpara) salvo que se trate de sistemas LED. Consideraciones al punto anterior:
  • Si se prevé que se puede perjudicar al siguiente usuario al apagarla, es recomendable (pero no obligatorio) consultar la lista de reservas y contactar con él.
  • Para asegurarnos el uso de la lámpara de fluorescencia, en nuestra hora de reserva, contactar con el usuario anterior y avisarle para que no la apague. Si no, nos tocará esperar los 30 minutos reglamentarios para su siguiente encendido.
Los daños ocasionados provenientes del mal uso de los equipos se cuantificarán, y se facturarán al laboratorio correspondiente.
LIMPIEZA
Procurad no manchar los objetivos que no necesitan aceite al girar el revolver sobre una muestra con aceite. Si esto ocurriera, no olvidéis limpiarlos cuidadosamente, o avisar al técnico para que lo haga.Tras usar aceite, hay que limpiar los objetivos y la pletina con servilletas humedecidas en metanol. En caso de duda sobre cómo hacerlo o ausencia de material, avisar al técnico. Es importante, puesto que si se deja aceite en la lente, cuando se seque, formará una película rígida adherida a la misma, que será más difícil de limpiar, con el consiguiente riesgo de rayar la lente.
3.    FORMULARIOS
4.    TARIFAS
 
Microscopio Confocal Leica TCS SP5X
Incubador
IBGM
0 €/hora
0 €/hora
CSIC/OPIS/UVA
E. PUBLICAS
33 €/hora
20 €/hora
E. PRIVADAS
60 €/hora
30 €/hora
TABLA DE TARIFAS IBGM-VALLADOLID 1
    Podrán contratarse tramos de media hora, excepto la primera hora, que se contratará entera. Las tarifas se cobrarán en base al tiempo de uso del microscopio, siendo las horas reservadas únicamente orientativas.Las reservas se realizarán con una anterioridad de 48h, siempre sujetas a disponibilidad por parte del personal del centro.La preparación de muestras correrá a cargo del usuario. Pueden emplearse portas estándar o bien placas de 35 mm, que sean aptas para microscopía.
5.   ANÁLISIS DE IMÁGENES
El servicio brinda a los usuarios asesoría para el análisis de imágenes obtenidas en el mismo con distintas herramientas de software libre: ImageJ/FIJI.
6.   PERSONAL Y CONTACTO
Técnico del servicio de microscopía (Microscopio Confocal y fluorescencia). Técnico del servicio de microscopía (Microscopio Confocal y Fret). Técnico del servicio de microscopía (Lector de placas multinodal y Seahorse).
La existencia, confianza y prestigio de las instalaciones del servicio de microscopía y análisis de imagen del IBGM dependen, en parte, del reconocimiento adecuado en las publicaciones. Se puede consultar más abajo la guía de reconocimiento y en las paredes cercanas a los equipos.Esta es una medida importante de la satisfacción de los usuarios, además de que permiten al servicio obtener ayudas y financiación para posibles arreglos o compra de nuevo equipos para que los usuarios puedan seguir brindando de los distintos servicios, además de poder ayudar al personal a avanzar en sus carreras científicas y su motivación personal. Cualquier publicación, ya sea de servicio interno o externo, con datos obtenidos en el servicio de microscopía se ruega sean comunicados al servicio para que conste en las estadísticas y contribuir a mejorar la calidad del mismo.

Página actualizada el 18 de septiembre de 2023

IBGM

Instituto De Biomedicina Y Genética Molecular de Valladolid.
Calle Sanz y Forés, 3, 47003 Valladolid. Ver mapa