Microscopía confocal
 
SERVICIO DE MICROSCOPÍA IBGM
ÍNDICE
 
1.   EQUIPO
a.   MANEJO.
b.   RESERVA.
d.   LIMPIEZA.
3.   FORMULARIOS
4.   TARIFAS.

 1.    EQUIPO

     Los equipos integrados en la Unidad de Microscopía son:

  1. Microscopio Confocal Leica TCS SP5 , con scanner Resonante, Láser Blanco (470 nm – 670 nm), 5 líneas de láser de Argón, y una línea 405
    Objetivos: 10x, 20x, 40x (oil) y 63x (oil).
  2. Microscopio Confocal BioRad laser scannig system Radiance 2100, equipado con tres líneas de láser Ar (457,476, 488, 514 nm), HeNe (543 nm) y Red Diode (637 nm) con microscopio modelo NIKON Eclipse TE2000-U, con platina motorizada.
    Objetivos: 10x, 20x, 40x, y 60x (oil).
  3. Microscopio de Fluorescencia NIKON Eclipse 90i, asociado con cámara CCD para tomar fotografías marca NIKON, modelo DS-Ri1.
    Objetivos: 4x, 10x, 20x, 40x, 60x y 100x (oil).
    Filtros: UV-2A (Ex 330-380), B-2A (Ex 450-490) y G-2A (Ex 510-560).
  4. Microscopio de fluorescencia NIKON Eclipse 80i. A partir de ahora se hará referencia a él como Microscopio de fluorescencia B.
    Objetivos: 1x, 2x, 4x, 10x, 20x, 40x, 60x (oil).
    Filtros: UV-2A (Ex 330-380) y B-2A (Ex 450-490).
 
      Además de estos equipos, se dispone de otros microscopios más pequeños distribuidos por todos los cuartos de cultivo, para poder ver contraste de fases, que pasamos a enumerar a continuación:    
  1. Cuarto de cultivos B10: NIKON, modelo Eclipse TS100.
    Objetivos: 4x, 10x, 20x y 40x.
    Filtros: Sin filtros
  2. Cuarto de cultivos C10: NIKON, modelo Eclipse TS100.
    Objetivos: 4x, 10x, 20x y 40x.
    Filtros: B-2A (Ex 450-490) y G-2A (510-560).
  3. Cuarto de cultivos D10: NIKON, modelo Eclipse TS100.
    Objetivos: 4x, 10x, 20x y 40x.
    Filtros: B-2A (Ex 450-490) y G-2A (510-560).
  4. Cuarto de cultivos E10: NIKON, modelo Eclipse TS100.
    Objetivos: 4x, 10x, 20x y 40x.
    Filtros: FITC (Ex 465-495) y G-2A (510-560).

 

2.   NORMAS DE FUNCIONAMIENTO
 
 
MANEJO
     El técnico, es la única persona autorizada para realizar manipulaciones que impliquen algún tipo de montaje en el equipo, tales como el cambio de las lámparas.
     El usuario, sólo estará autorizado a realizar las operaciones oportunas para la búsqueda de campos, captura de imágenes, y análisis de las mismas.
     Si no se tiene conocimiento sobre el funcionamiento de un equipo, se debe contactar con el técnico (crissv@ibgm.uva.es), y solicitar un entrenamiento básico previo a la utilización de los equipos.
 
RESERVA

    La reserva de los aparatos se realizará a través de la intranet del centro

    Dentro del área de Reservas, en el apartado destinado a Microscopçia:

Confocal Leica sp5
Microscopio confocal (biorad)
Unidad de Microscopía A
Unidad de Microscopía B

     Se permite la reserva de un mínimo de 30 minutos y un máximo de dos horas para un mismo usuario y para las Unidades de Microscopía A y B. Para los microscopios confocal, debido a que el uso puede ser mayor de dos horas, se permite ampliar la reserva, en función del tipo de experimento, muestreo que se quiera hacer.

     En el caso en el que no se fuera a hacer uso de la reserva, es importante realizar la anulación de la misma, con una antelación mínima de una hora, para facilitar a otros usuarios la posibilidad de utilizar el equipo.

     La reserva del microscopio Confocal Leica sp5, se realizará con una antelación mínima de un día, contactando con el técnico para informar de los fluorocromos empleados, y facilitar la búsqueda de un método adecuado y óptimo para cada muestra. Para ello, existe un enlace dentro de la página de la reserva en la que aparece “Documento para la solicitud”, que el usuario mandará al técnico una vez haya rellenado, vía e-mail o en persona.

    En el caso en el que no se fuera a hacer uso de la reserva, es importante realizar la anulación de la misma, con una antelación mínima de una hora, para facilitar a otros usuarios la posibilidad de utilizar el equipo.

    Así mismo, se recomienda la reserva con antelación para todos los microscopios, sobre todo en aquellos casos en los que se necesite la ayuda o asesoramiento del técnico, o se trate de un experimento que deba realizarse un día concreto. De ese modo se evita que pueda haber otro usuario reservado.

   El servicio ofrecido a los investigadores internos del IBGM es gratuito. Los investigadores no registrados y externos al IBGM, que estén interesados en el uso del recurso, deberán examinar detenidamente los procedimientos del servicio y ponerse en contacto con el personal de la unidad.

 
INCIDENCIAS

    Cualquier duda, problema o fallo de funcionamiento de cualquiera de los equipos, debe ser comunicado con la mayor brevedad posible al responsable del servicio, ya bien sea, en persona o vía correo electrónico comunicando la incidencia, y debe anotarse claramente en el parte de trabajo, donde, también es de obligado cumplimiento la anotación de las horas de uso del equipo así como el contador de la lámpara de fluorescencia.

     Los archivos guardados en el ordenador del microscopio confocal y en el ordenador del microscopio de fluorescencia A, se mantendrán de manera semestral. Pasado ese tiempo, se realizará un borrado general de los archivos que superen el periodo establecido. Se dará aviso previo a su eliminación. Para evitar posibles problemas de pérdidas de imágenes, se ruega que los usuarios guarden sus imágenes en las carpetas compartidas del servidor, y las cojan de ahí en un periodo corto.

     El usuario tiene la obligación, si nadie le avisa de lo contrario, de apagar la lámpara de fluorescencia una vez que haya concluido su hora de reserva. Recordad, que hay que esperar 30 minutos para volver a encenderla de nuevo. (muy importante esta consideración, de cara, tanto a una toma de mejores imágenes como a una prolongación de la vida de la lámpara).

     Consideraciones al punto anterior:

  • Si se prevé que se puede perjudicar al siguiente usuario al apagarla, es recomendable (pero no obligatorio) consultar la lista de reservas y contactar con él.
  • Para asegurarnos el uso de la lámpara de fluorescencia, en nuestra hora de reserva, contactar con el usuario anterior y avisarle para que no la apague. Si no, nos tocará esperar los 30 minutos reglamentarios para su siguiente encendido.

     Los daños ocasionados provenientes del mal uso de los equipos se cuantificarán, y se facturarán al laboratorio correspondiente.

 
LIMPIEZA

     Los objetivos 4x, 10x, 20x, 40x de las unidades de Microscopia A y B no se usan con aceite de inmersión, Así como los objetivos 60x del microscopio de fluorescencia A.
Procurad no mancharlos al girar el revolver sobre una muestra con aceite. Si esto ocurriera, no olvidéis limpiarlos cuidadosamente, ó avisar al técnico para que lo haga.

     Los objetivos 60x del microscopio confocal Biorad y del microscopio de fluorescencia B, así como el objetivo 100x del microscopio de fluorescencia A, y los objetivos 40x y 60x del microscopio Confocal Leica, se usan con aceite de inmersión.

     Tras usar aceite, hay que limpiar los objetivos y la pletina con servilletas humedecidas en metanol. En caso de duda sobre como hacerlo o ausencia de material, avisar al técnico. Es importante, puesto que si se deja aceite en la lente, cuando se seque, formará una película rígida adherida a la misma, que será más difícil de limpiar, con el consiguiente riesgo de rayar la lente.

 

3.    FORMULARIOS

A -  Formulario de solicitud de reserva del Confocal Leica (.doc)

B -  Formulario de prestación de servicio Externo IBGM Valladolid (.doc)
 

 
4.    TARIFAS
 
 
 
Microscopio Confocal Leica TCS SP5
Láser Blanco/Argón
Diodo Azul
Incubador
IBGM
0 €/hora
0 €/hora
CSIC/OPIS/UVA
E. PUBLICAS
40 €/hora
20 €/hora
E. PRIVADAS
60 €/hora
30 €/hora
TABLA DE TARIFAS IBGM-VALLADOLID 1
 
    Podrán contratarse tramos de media hora, excepto la primera hora, que se contratará entera. Las tarifas se cobrarán en base al tiempo de uso del microscopio, siendo las horas reservadas únicamente orientativas.Las reservas se realizarán con una anterioridad de 48h, siempre sujetas a disponibilidad por parte del personal del centro.

     La preparación de muestras correrá a cargo del usuario. Pueden emplearse portas estándar o bien placas de 35 mm, que sean aptas para microscopía.
 
 
5.   PERSONAL Y CONTACTO

Técnico del servicio de microscopía.
          Cristina Sánchez Vicente.crissv@ibgm.uva.es

          Yolanda Noriega García.  ynoriega@ibgm.uva.es

Responsable investigador del servicio de microscopía.
          María A. Balboa. mbalboa@ibgm.uva.es

Nota 1: Para cualquier consulta relacionada con el servicio de microscopía, contactar con el técnico o con el responsable investigador.

 

 

 

 

Página actualizada el 01 de diciembre de 2014

 

IBGM

Instituto De Biología Y Genética Molecular.
Calle Sanz y Forés, 3, 47003 Valladolid. Ver mapa